2025-04-23
行业资讯
Heymann肾炎的主要致病原是gp330糖蛋白和44kD受体相关蛋白（RAP）组成的Heymann肾炎抗原复合物（HNAC）。急性肾盂肾炎模型用肾脏作抗原，诱导抗肾血清，再用抗血清诱导肾炎。
实验步骤：
A. 取成年 SD 大鼠肾皮质，每克肾皮质加 10 mL 的 10 mmol/L Tris-HCl（pH7.1），4 ℃ 匀浆，加入 1 mmol/L MgCl2，使其终浓度为 10 mmol/L，搅拌，1000 g 离心 10 分钟，取上清，16 000 g 离心 12 分钟，去上清，沉淀以 10 mmol/L 甘露醇或 2 mmol/L Tris-HCI 溶解，加 1 mol/L MgCl2 使其终浓度 10 mmol/L，搅拌，1500 g 离心，取上清，17 500 g 离心 12 分钟，去上清，沉淀用生理盐水洗 3 次（24 000 g，10 分钟），最后以 3 mL 盐水混悬，-70 ℃ 保存备用。
B. 取 7 mg 前述混悬液蛋白与等量弗氏佐剂混匀，给 1.5 kg 左右的新西兰大耳白兔分 4 处皮下注射，每处 0.5 mL，每周注射 1 次，连续 6 周，收集兔血清，56 ℃、30 分钟灭活补体。以正常大鼠的浓缩红细胞吸附兔抗血清中的抗大鼠血成分抗体。
C. 将经处理的免抗鼠肾血清 1~1.5 mL 给 SD 大鼠作静脉注射，1 小时后重复注射一次。
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