前沿细胞治疗赛道飞速发展，in vivo CAR-T 药物体内药效评价是临床前研发的核心环节。如何在含人免疫系统的动物模型中，精准评估载体的靶向递送效率、体内 CAR-T 细胞生成动力学、抗肿瘤药效以及 CRS 等安全性风险？

澎立生物作为国内最早聚焦于临床前药效学评价的 CRO 之一，依托先进的人源化小鼠模型平台和丰富的 in vivo CAR-T 项目经验，为全球创新药企提供从概念验证到 IND 申报的一站式体内药效评价服务。本文将通过实战案例，详解澎立生物在该领域的核心能力。

in vivo CAR-T 如何颠覆传统疗法

近年来，随着载体技术和基因编辑工具的突破，in vivo CAR-T 疗法正从概念走向临床验证，成为肿瘤免疫治疗领域最具潜力的下一代技术方向。与传统体外制备 CAR-T 相比，in vivo CAR-T 通过在患者体内直接改造 T 细胞，有望实现“一针即可成药”的愿景——显著降低成本、缩短制备周期、提高患者可及性^[1](Fig.1)。

这意味着：数周 → 数天；百万元 → 可及的价格。

Figure1. ex vivo CAR-T cell therapy and in vivo CAR-T cell therapy

技术路径：谁能精准“改装”体内的 T 细胞

目前 in vivo CAR-T 主要沿着两条技术路线齐头并进(Fig.2)：

Figure 2. Vector platforms for in vivo CAR delivery: viral vectors and non-viral vectors

澎立生物in vivo CAR-T 药效评价的核心：人源化小鼠模型

1、in vivo CAR-T 药效评价的核心：人源化小鼠模型

对于 in vivo CAR-T 疗法，免疫系统人源化小鼠模型是评估药效的关键工具。澎立生物是国内最早将免疫系统人源化小鼠投入临床前药效学研究的 CRO 之一，也是国内少数掌握第二代（髓系加强） hCD34+ 人源化小鼠的企业。

2、实战案例展示：基于 PBMC 人源化小鼠模型的in vivo CAR-T 药效试验

2.1 实验方案设计（下方时间线）

分组设置：分为 4 组（每组 n=5）：

G1: Vehicle Control (i.v. once)

G2: Low Dose LVV (i.v. once)

G3: Medium Dose LVV (i.v. once)

G4: High Dose LVV (i.v. once)

2.2 关键结果（部分）

2.2.1体内肿瘤活性

体内 CAR-T 疗法展现出显著的剂量依赖性抗肿瘤活性：高剂量（G4）诱导肿瘤完全消退，低/中剂量亦有效抑制肿瘤进展（Fig.3b）。同时，治疗组（G2-G4）虽出现轻微体重波动，但无严重体重减轻，整体耐受性良好（Fig.3a）

Figure 3. Safety and efficacy profiles of CAR-T therapy in the Hep3B xenograft model. (a)Mean body weight (g) of mice in each group over the 28-day study period. (b)Tumor volume (mm³) growth curves of mice receiving different doses of LVV.Data are presented as mean ± SEM (n = 5 per group).

2.2.2 体内 CAR-T 细胞扩增动力学

CAR-T 细胞在人源化小鼠体内的增殖与存续表现出明显的剂量依赖性。如图 4 所示。外周血中 hCD45 + 细胞比例随给药剂量升高而显著增加，高剂量组（G4）在给药后第 21 天可达约 90%(Fig.4a)。此外，高剂量组中，CAR + 细胞在 hCD45 + 细胞中的比例于第 14 天达到峰值（近 70%），并在第 28 天仍维持在约 60%，提示高剂量 CAR-T 细胞具有优异的体内扩增能力与长效存续特性(Fig.4b)。

Figure 4. in vivo CAR-T cell expansion kinetics and dose dependency. (a)Percentage of hCD45+ cells among total CD45+ cells. (b)Percentage of CAR+ cells among hCD45+ cells. Data are presented as mean ± SEM (n = 5 per group).

本次体内实验充分验证了该款 CAR-T 制剂的体内有效性与安全性，为客户后续细胞制剂优化、临床前研究申报提供了扎实的动物实验数据支撑。

3、多维度检测体系，精准赋能 in vivo CAR-T 药效评价

in vivo CAR-T 药效评价离不开精准的生物分析。澎立生物建立了多平台、多维度的检测体系，支持从分子到细胞、从局部到全身的全方位评估。目前，澎立生物肿瘤部可全面承接血液瘤 / 实体瘤 in vivo CAR-T 小鼠药效评估、模型定制、机制探索、毒性评价等服务。